客户案例| InnoMedia®杂交瘤基础培养基如何助力实现高效细胞培养?
通过杂交瘤技术生产鼠源单克隆抗体(mAb)长期以来一直是治疗开发和诊断应用的重要平台。然而,随着CHO抗体生产平台的发展,杂交瘤技术现在更常用于研究与开发早期阶段的快速抗体生成。这一转变给杂交瘤基础培养基带来了新的挑战,培养基必须表现出优越的无血清适应性,并针对batch培养进行特定优化。
传统上,在含血清培养基中培养的细胞无血清适应,常导致细胞表现产量下降。我们的InnoMedia®杂交瘤基础培养基通过提供卓越的适应性来应对这些挑战,能够实现从含血清或其他无血清培养基的直接接种培养,几乎无需适应。此外,它支持从贴壁培养到悬浮培养的直接过渡,而无需细胞适应。

InnoMedia®杂交瘤基础培养基是一种化学定义的、低蛋白、无动物成分的基础培养基,适用于杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞的悬浮培养。支持杂交瘤细胞从适应阶段到batch培养中的高产抗体生产。
主要优势包括:
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传代稳定性:支持超过40代/3个月的培养。
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无血清适应性:从传统含血清培养基到悬浮培养的直接过渡,无需无血清适应。
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Batch培养模式特化:对比竞品培养基强化培养基中营养量,batch培养周期无需进行额外补料。
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高细胞存活率和抗体产量:在Batch培养周期内提高细胞生长和IgG生产。

从贴壁培养到悬浮培养的直接杂交瘤单克隆抗体生产
本应用说明展示了我们的杂交瘤CD基础培养基在单克隆抗体生产中的卓越性能,以及从贴壁培养到悬浮培养的直接过渡,重点关注其对细胞生长、存活率和IgG生产力在单次批量培养中的影响。

材料和方法:
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细胞株:杂交瘤细胞株A&B(Sp2/0衍生细胞株,生产单克隆抗体,分子量约为150 kDa)。
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初始培养条件:
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细胞在DMEM+10% FBS贴壁培养中培养,然后直接转移到使用CD杂交瘤培养基的悬浮培养中。
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培养条件:
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基础培养基:
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InnoMedia®杂交瘤基础培养基(CM-L101001)
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来自竞争公司#1、#2和#3的CD杂交瘤培养基
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培养体系:125毫升塑料一次性摇瓶(培养体积45毫升),在130 rpm的轨道摇床平台上培养。细胞以1 × 10^6活细胞/ml接种。所有培养均在8% CO2的湿润气氛中进行。
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无补料:InnoMedia®培养基在batch培养中无额外补料,其他培养基根据制造商提供的说明进行必要的补充。
在比较细胞生长研究中,DMEM + 10% FBS中生长的杂交瘤细胞直接接种至各种的杂交瘤CD培养基,以评估直接悬浮batch培养中的生长和单克隆抗体生产。使用台盼蓝染色法,通过Altair™自动细胞计数器(Countstar™)确定细胞计数和存活率。抗体通过蛋白G单步纯化收集,纯化的IgG滴度通过NanoDrop™根据计算的消光系数进行测定。
实验结果:
在细胞株#1的案例中,我们的培养基的峰值细胞浓度(VCD)达到了6.7 × 10^6活细胞/ml,比测试过的最佳竞争者高出约200%;IgG滴度达到了170 mg/L,比测试过的最佳竞争者高出170%。
在细胞株#2的案例中,我们的培养基的峰值细胞浓度达到了13.2 × 10^6活细胞/ml,比测试过的最佳竞争者高出约320%;IgG滴度达到了250 mg/L,比测试过的最佳竞争者高出250%。

杂交瘤单克隆抗体生产-腹水法及体外培养法对比
本应用说明展示了我们的杂交瘤CD基础培养基在单克隆抗体生产中的卓越性能,以及从贴壁培养到悬浮培养的直接过渡,重点关注用该培养基进行体外培养的形式参数对比传统腹水法的差异(包括细胞生长、存活率以及抗体产量&活性)。

材料和方法:
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细胞株:Sp2/0衍生杂交瘤细胞株,生产单克隆抗体,共六种抗体(包括4种IgG以及两种IgM)
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培养条件:体外培养法:细胞在DMEM + 10% FBS贴壁培养中培养,然后直接转移到使用CD杂交瘤培养基的悬浮培养中,batch培养直至活性下降收获
在比较细胞生长研究中,DMEM + 10% FBS中生长的杂交瘤细胞直接接种至各种的杂交瘤CD培养基,以评估直接悬浮batch培养中的生长和单克隆抗体生产。使用台盼蓝染色法,通过Altair™自动细胞计数器(Countstar™)确定细胞计数和存活率。抗体通过蛋白G单步纯化收集,纯化的IgG滴度通过NanoDrop™根据计算的消光系数进行测定。
实验结果:
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抗体活性数据(客户反馈数据)


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抗体活性数据(客户反馈数据)


根据对六个细胞株的测试,InnoMedia®杂交瘤基础培养基在使用体外培养法时,其细胞生长、存活率,抗体产量及活性,相比传统腹水法产抗体,普遍表现出优势性能。

该杂交瘤CD基础培养基非常适合于:
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单克隆抗体生产:在可扩展的批量系统中高效生产治疗性和诊断性抗体。
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研究与开发:适用于杂交瘤筛选、抗体特性研究和临床前研究中的工艺开发。
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批量培养系统:简化的过程,无需复杂的喂养策略,降低成本并简化生物加工。
InnoMedia®杂交瘤基础培养基为杂交瘤细胞培养提供了强有力的解决方案,支持从贴壁培养到悬浮培养的直接适应,并在单次批量过程中表现出强大的性能。
该培养基增强了细胞生长、存活率和单克隆抗体生产力,非常适合于研究和商业单克隆抗体生产应用。

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关于百因诺生物
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