客户案例| InnoMedia®杂交瘤基础培养基如何助力实现高效细胞培养？

   通过杂交瘤技术生产鼠源单克隆抗体（mAb）长期以来一直是治疗开发和诊断应用的重要平台。然而，随着CHO抗体生产平台的发展，杂交瘤技术现在更常用于研究与开发早期阶段的快速抗体生成。这一转变给杂交瘤基础培养基带来了新的挑战，培养基必须表现出优越的无血清适应性，并针对batch培养进行特定优化。

    传统上，在含血清培养基中培养的细胞无血清适应，常导致细胞表现产量下降。我们的InnoMedia®杂交瘤基础培养基通过提供卓越的适应性来应对这些挑战，能够实现从含血清或其他无血清培养基的直接接种培养，几乎无需适应。此外，它支持从贴壁培养到悬浮培养的直接过渡，而无需细胞适应。

   InnoMedia®杂交瘤基础培养基是一种化学定义的、低蛋白、无动物成分的基础培养基，适用于杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞的悬浮培养。支持杂交瘤细胞从适应阶段到batch培养中的高产抗体生产。

主要优势包括：

• 传代稳定性：支持超过40代/3个月的培养。

• 无血清适应性：从传统含血清培养基到悬浮培养的直接过渡，无需无血清适应。

• Batch培养模式特化：对比竞品培养基强化培养基中营养量，batch培养周期无需进行额外补料。

• 高细胞存活率和抗体产量：在Batch培养周期内提高细胞生长和IgG生产。

从贴壁培养到悬浮培养的直接杂交瘤单克隆抗体生产

    本应用说明展示了我们的杂交瘤CD基础培养基在单克隆抗体生产中的卓越性能，以及从贴壁培养到悬浮培养的直接过渡，重点关注其对细胞生长、存活率和IgG生产力在单次批量培养中的影响。

材料和方法：

• 细胞株：杂交瘤细胞株A&B（Sp2/0衍生细胞株，生产单克隆抗体，分子量约为150 kDa）。

• 初始培养条件：

• • 细胞在DMEM+10% FBS贴壁培养中培养，然后直接转移到使用CD杂交瘤培养基的悬浮培养中。

培养条件：

• 基础培养基：

• • InnoMedia®杂交瘤基础培养基（CM-L101001）

  • 来自竞争公司#1、#2和#3的CD杂交瘤培养基

• 培养体系：125毫升塑料一次性摇瓶（培养体积45毫升），在130 rpm的轨道摇床平台上培养。细胞以1 × 10^6活细胞/ml接种。所有培养均在8% CO2的湿润气氛中进行。

• 无补料：InnoMedia®培养基在batch培养中无额外补料，其他培养基根据制造商提供的说明进行必要的补充。

    在比较细胞生长研究中，DMEM + 10% FBS中生长的杂交瘤细胞直接接种至各种的杂交瘤CD培养基，以评估直接悬浮batch培养中的生长和单克隆抗体生产。使用台盼蓝染色法，通过Altair™自动细胞计数器（Countstar™）确定细胞计数和存活率。抗体通过蛋白G单步纯化收集，纯化的IgG滴度通过NanoDrop™根据计算的消光系数进行测定。

实验结果：

    在细胞株#1的案例中，我们的培养基的峰值细胞浓度（VCD）达到了6.7 × 10^6活细胞/ml，比测试过的最佳竞争者高出约200%；IgG滴度达到了170 mg/L，比测试过的最佳竞争者高出170%。

    在细胞株#2的案例中，我们的培养基的峰值细胞浓度达到了13.2 × 10^6活细胞/ml，比测试过的最佳竞争者高出约320%；IgG滴度达到了250 mg/L，比测试过的最佳竞争者高出250%。